一種ABO血型檢測卡的制備方法,包括含有六個微柱的檢測卡,其特征在于:所述六個微柱中前三個微柱分別裝有等量的抗A凝膠、抗B凝膠和抗D凝膠,其余三個微柱裝有等量的空白凝膠,其通過以下方法制備而成:
(1)葡聚糖凝膠的溶脹:選用至少兩種交聯(lián)葡聚糖凝膠進(jìn)行混合,然后加入純化水中進(jìn)行充分懸浮溶脹,再用純化水洗滌去除破碎顆粒,得到大小均勻、呈完整球形的葡聚糖凝膠顆粒;
(2)制備各抗體稀釋液:抗A稀釋液:以生理鹽水為基液,其中含有乙二胺四乙酸二鉀鹽10?15g/L、牛血清白蛋白20?25g/L、蔗糖15?20g/L,稀釋液的pH值為6.6?6.8;抗B稀釋液:以生理鹽水為基液,其中含有乙二胺四乙酸二鉀鹽15?20g/L、牛血清白蛋白15?20g/L、蔗糖25?30g/L,稀釋液的pH值為6.6?6.8;抗D稀釋液:以磷酸鹽緩沖液為基液,其中含有乙二胺四乙酸二鉀鹽10?15g/L、牛血清白蛋白35?40g/L,稀釋液的pH值為6.6?6.8;空白凝膠洗滌緩沖液:以純化水為溶劑,緩沖液中含有氯化鈉1.75g?2.07g/L、磷酸氫二鈉0.185?0.219g/L、磷酸二氫鈉0.203?0.24g/L、甘氨酸18?21g/L;并調(diào)節(jié) pH值為6.6?6.8;
(3)制備各抗體工作液:取抗A單克隆抗體濃縮液與抗A稀釋液進(jìn)行混合,使得到的抗A單克隆抗體工作液的效價≥128;取抗B單克隆抗體濃縮液與抗B稀釋液進(jìn)行混合,使得到的抗B單克隆抗體工作液的效價≥128;取抗D單克隆抗體濃縮液與抗D稀釋液進(jìn)行混合,使得到的抗D單克隆抗體工作液的效價≥64;
(4)凝膠洗滌:取六份等量的葡聚糖凝膠顆粒,其中三份分別用等量的抗A稀釋液、抗B稀釋液和抗D稀釋液進(jìn)行洗滌至少三次,再加入相對應(yīng)的抗A單克隆抗體工作液、抗B單克隆抗體工作液和抗D單克隆抗體工作液進(jìn)行混合,得到抗A凝膠、抗B凝膠和抗D凝膠;再將另外三份葡聚糖凝膠顆粒分別用等量的空白凝膠洗滌緩沖液進(jìn)行洗滌至少三次,再加入空白凝膠洗滌緩沖液進(jìn)行混合,得到三份空白凝膠;
(5)分裝:按照每管24?32微升的量,將抗A凝膠、抗B凝膠、抗D凝膠依次加到空白檢測卡的前三個微柱中,將三份空白凝膠分別加到空白檢測卡的后三個微柱中,形成ABO正反定型及RhD血型檢測卡。
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